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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章使用NK細(xì)胞培養(yǎng)套裝有哪些注意事項?

使用NK細(xì)胞培養(yǎng)套裝有哪些注意事項?

更新時間:2026-07-03點擊次數(shù):109
  NK培養(yǎng)套裝是用于NK細(xì)胞體外激活、擴(kuò)增的專用無血清培養(yǎng)體系,適配外周血、臍帶血、凍存PBMC等多種樣本。
 
  使用NK培養(yǎng)套裝該類產(chǎn)品需重點關(guān)注以下操作與環(huán)境注意事項:
 
  ‌試劑預(yù)處理要求‌
 
  每次添加的培養(yǎng)基需提前取出放置培養(yǎng)箱中預(yù)溫至37℃,‌禁止將整瓶培養(yǎng)基放置37℃反復(fù)預(yù)溫‌,避免營養(yǎng)成分失活。
 
  ‌樣本處理時效要求‌
 
  外周血采集后需在8小時內(nèi)完成PBMC分離,分離前血液、PBS、淋巴細(xì)胞分離液需提前平衡至20℃,全程室溫離心,保障單個核細(xì)胞活性。
 
  ‌培養(yǎng)基使用規(guī)范‌
 
  提取PBMC、第0天接種、第3/5天補(bǔ)液階段必須使用激活培養(yǎng)基,不可提前切換為擴(kuò)增培養(yǎng)基,否則會影響NK細(xì)胞的激活效率。
 
  ‌接種密度控制‌
 
  推薦接種密度為1.5×10?~2×10?個/mL,接種密度過低或過高,都會直接影響最終收獲的細(xì)胞總數(shù)和NK細(xì)胞純度。
 
  ‌操作細(xì)節(jié)要求‌
 
  第3天補(bǔ)液時動作需輕柔,不可將貼壁的激活細(xì)胞晃起;T25培養(yǎng)瓶需略微傾斜放置,避免液體溢出瓶口造成污染。
 
  ‌特殊樣本適配要點‌
 
  使用臍血樣本時,需先用紅細(xì)胞裂解液去除殘留紅細(xì)胞后再計數(shù),避免因計數(shù)偏差導(dǎo)致接種密度不符合要求,影響后續(xù)擴(kuò)增效果。
 
  ‌試劑存儲要求‌
 
  未開封的無血清培養(yǎng)基需在2~8℃環(huán)境下避光保存,誘導(dǎo)因子類試劑需在-20℃環(huán)境下凍存,避免反復(fù)凍融導(dǎo)致活性失效。
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