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產(chǎn)品中心細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞凍存液AS-36同立海源細(xì)胞保存液
產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品分類
同立海源細(xì)胞保存液
貨號：AS-36
規(guī)格：
100mL
保存條件：
2~8℃，避光保存
有效期：
12個(gè)月
性狀：
液體
同立海源細(xì)胞保存液
產(chǎn)品描述：
本品為無色至淡黃色透明溶液，有粘性，含5%DMSO。適用于PBMC、T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞凍存。僅供科研用途。
準(zhǔn)備細(xì)胞
1. 待冷凍細(xì)胞配制成細(xì)胞懸液（機(jī)械法或酶法解離）。
2. 細(xì)胞懸液離心獲得沉淀。
3. 去除上清液-注意：盡可能多地移除清洗液，以降低凍存液被稀釋程度。
細(xì)胞凍存
1. 加入預(yù)冷的（2-8°C）凍存液。
a. 細(xì)胞密度：細(xì)胞密度按照常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)方案0.5-30×106細(xì)胞/mL(可以更高)。
b. 凍存液已經(jīng)混合了DMSO，不需要再添加其他任何凍存劑。
2. 預(yù)冷：細(xì)胞/凍存液混合懸液2-8°C孵育約10分鐘。
3. 程序降溫：
a. 如使用程序降溫盒則應(yīng)將凍存的細(xì)胞懸液置于提前預(yù)冷至2-8°C的降溫盒中，再將程序降溫盒置于-80°C冰箱中，24h后移入液氮罐(低于-130°C)長期保存。
b. 如使用程序降溫儀對凍存的細(xì)胞懸液進(jìn)行-1°C/min進(jìn)行降溫至-100℃后，應(yīng)立即置于液氮罐(低于-130°C)中長期保存。
c. 凍存后的樣品應(yīng)在液氮罐(低于-130°C)中長期保存，如若放置于-80°C冰箱，僅建議短期儲存(數(shù)周至數(shù)月)。
樣品解凍
1. 解凍復(fù)蘇：在37°C水浴或同類似的機(jī)械解凍裝置中快速解凍樣品。
a. 樣品解凍時(shí)應(yīng)輕輕地旋轉(zhuǎn)樣品，直到所有可見的冰都融化。1mL凍存樣本解凍時(shí)間大約2-3分鐘。
b. 不允許樣品在冷凍溫度(0-10°C)以上加熱。水浴中拿出來時(shí)，凍存管觸感是冷的。不推薦被動解凍。
2. 立即用培養(yǎng)基或等效等滲介質(zhì)稀釋細(xì)胞/冷凍液混合物。
a. 稀釋程序可以在一個(gè)步驟中完成。
b. 稀釋介質(zhì)溫度應(yīng)在20°C到 37°C之間。
c. 建議稀釋比為1:10(樣品與介質(zhì))或更大。
3. 合適的條件下培養(yǎng)細(xì)胞或立即使用細(xì)胞。
注意事項(xiàng)：
凍存液已經(jīng)混合了DMSO，不需要再添加其他任何凍存劑；
凍存液使用前需預(yù)冷（2-8℃）；
細(xì)胞凍存需梯度降溫。
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